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【实验原理】
毛发是皮肤重要的附属器，覆盖于皮肤表面，起到保护肌肤、调节体温等作用。毛发通常可分为两部分：突出表皮的部分称为毛干，生长于皮肤内部的称为毛囊。毛囊由结缔组织鞘、毛乳头、外毛根鞘、内毛根鞘、毛球和黑素细胞等构成。毛发的生长不是陆续在的，而是周期循环的，其生长周期包括生长期、退行期、休止期，受到遗传、环境、激素等因素的影响。毛囊的活性是毛发生长的关键，顺利获得将毛囊暴露于待测样品中，可以观察样品对毛囊形态、毛囊细胞凋亡率的影响，从而评估样品是否具有提升毛囊存活率的潜力。
TUNEL染色法是利用末端脱氧核苷酸转移酶（TdT）将带有荧光或酶标记的dUTP连接到DNA双链断裂（凋亡特征）的3'-OH末端，顺利获得检测标记信号强度与位置，可精确定位并量化凋亡细胞。顺利获得毛囊切片和TUNEL染色法可以检测毛囊凋亡细胞比例，从而反应毛囊活性。
【评价指标】
1、毛囊形态学观察
2、毛囊凋亡细胞比例
【实验方案】
1、离体毛囊的获取：在解剖显微镜下，手术分离单个毛囊单位，去除多余脂肪和皮肤组织，保留完整毛囊结构，筛选形态良好、毛球饱满且处于生长期的毛囊备用。
2、离体毛囊预培养：将筛选好的毛囊放于毛囊培养基中，放于培养箱中预培养1~2天，让毛囊从分离损伤中恢复，并剔除预培养期间停止生长或退化的毛囊。
3、样品处理：将预培养后的离体毛囊分为正常对照组、待测样品组，分别加入含有相应处理物质的培养基，将离体毛囊放于培养箱中继续培养。
4、培养期间观察：隔天在体式显微镜下拍照并观察毛囊形态结构，评估毛囊结构的完整性。
5、终点检测：在实验终点，收取体外培养的离体毛囊，使用TUNEL染色法检测毛囊凋亡细胞情况，并计算毛囊凋亡细胞比例。
【结果展示】（图片仅供参考，具体视实验而定）
图1 离体毛囊的形态学观察
图2 离体毛囊TUNEL染色典型图及柱形图
【评价结论】（仅供参考，具体视实验分组而定）
1、与对照组相比，样品组的离体毛囊在样品处理X天后，毛乳头、外毛根鞘完整，毛囊与毛干连接处完整，表明样品可促进毛囊存活。
2、与对照组相比，样品组的离体毛囊在样品处理X天后，毛囊凋亡细胞比例显著下降XX%，即毛囊活性提升XX%，表明样品可以提升毛囊存活率。
【参考文献】
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