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利用斑马鱼模型评价改善肝纤维化功效

【评价原理】

斑马鱼肝脏从受精后22小时（22 hpf）开始发育，24-50 hpf分化，2天（2 dpf）形成初级形态，3天（3 dpf）完全成熟，其肝脏结构与哺乳动物不同，肝细胞呈小管状排列，而非板状。尽管解剖结构有差异，但细胞类型和功能相似，且具有同源的药物代谢酶基因（如cyp1a、cyp2r1、cyp2u1）。肝纤维化是肝脏对有害刺激的持续愈合反应，涉及HSCs激活和ECM沉积。TAA具有肝毒性，代谢后干扰RNA转移，激活磷脂酶A2，导致肝细胞凋亡和肝损伤。TAA诱导的肝纤维化表现为胶原沉积、纤维化标志物（Hand-2、Acta-2）和炎症因子（TGF-β、SDF-1a、SDF-1b）表达增加，肝脏缩小，与人类肝纤维化机制高度相似。

【实验方案】

我们将受测试斑马鱼分成三组，分别是正常对照组、模型对照组和供试品组。其中正常对照组不进行其他处理，模型对照组和供试品组均用TAA诱导。供试品组在TAA处理后，立即摄入供试品。

服用一段时间供试品后，对斑马鱼整体进行包埋切片和氨银染色，经生物显微镜观察斑马鱼肝纤维化情况。

【结果展示】

图1. 斑马鱼肝脏脂肪染色强度表型图

（网状纤维着黑色，胶原纤维着黄或黄褐色，细胞核着褐或黑褐色，红色箭头指向网状纤维）

从实验结果可以看到，服用供试品组斑马鱼肝纤维化较模型对照组显著改善。

【评价结论】

1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验，服用或注射供试品组的斑马鱼肝纤维化较模型对照组显著改善。

2.本实验证实供试品具有改善肝纤维化功效。

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